CT-1PLUS电位滴定仪恒PH滴定测定青某霉某素酰化酶活性

关键词：青某霉某素酰化酶

行业：医药/高校

CT-1PLUS恒PH滴定测定青某霉某素酰化酶活性

摘要

青某霉某素酰化酶，又称为青某霉某素酰胺酶或青某霉某素氨基水解酶。主要从大肠埃希菌胞内酶和巨大芽孢杆菌胞外酶获得，该酶已大规模应用于工业生产β-内酰胺类抗生素的关键中间体和半合成β-内酰胺类抗生素。本试验通过CT-1Plus恒pH滴定来进行青某霉某素酰化酶活性测试。

仪器配置

●CT-1Plus电位滴定仪

●pH-102

●20mL高精度计量管

●100mL滴定杯

试剂配置

●滴定剂：氢氧化钠标准溶液

●滴定度：0.1001mol/L

●溶剂：磷酸盐缓冲溶液

●其它试剂：钾盐

测定方法

●酸碱中和/恒pH滴定

●控制反应体系pH值在8.0，在磷酸缓冲体系中加入一定量的青某霉某素酰化酶和青某霉某素钾盐，插入电极和滴定头，选用恒pH滴定方法，用标准氢氧化钠标准溶液进行滴定。

仪器参数    

● 最小滴定体积：10μL  

● 最大滴定体积：10μL

● 搅拌速度：200      

● 每滴间隔：800ms

● 终点模式：恒pH  

● 终点设置：8.0

测试数据

● 环境温度：20℃

● 环境湿度：50%

● 测试时间：5min

测试结果：该青某霉某素酰化酶在本次实验条件下的酶活力为72.8 I.U。